保存Western Blot(WB)结果的膜是为了长期保存结果和复现实验。以下是一些保存WB膜的建议:
1. 膜固定:在完成WB显影后,首先要对膜进行固定,以保留目标蛋白的位置和强度。通常使用带有染料(例如Ponceau S)的固定溶液或10%乙醇/醋酸来固定膜。
2. 膜干燥:将固定的膜在室温下晾干,可以使用吸水纸轻轻吸去多余的湿气。确保膜在完全干燥的情况下进行后续步骤。
3. 保存膜:保存干燥的膜时,建议将其放置在干燥、避光和密封良好的容器中,如密封袋或琼脂糖盒。此外,存放在低温(通常为-20摄氏度)和干燥的条件下,可以延长膜的保存时间。
4. 避免重复冻融:避免多次冻融膜,因为这可能会导致膜上的蛋白质降解和信号的损失。建议根据需要将膜切割成适当大小的小片,以便每次使用时只解冻一小部分。
关于保存时间,保存的WB膜通常可以持续数个月至数年。然而,保存时间可能会因多种因素而有所差异,包括蛋白质的稳定性、膜的质量和保存条件等。为了确保结果的准确性,在长时间保存后使用膜时,最好再次验证结果或与新的实验结果进行比较。